Simone杆状病毒滴度检测
的有关信息介绍如下：
实验概要
本实验介绍了检测病毒滴度的方法。
实验原理
根据噬菌斑数计算病毒滴度。
无菌条件下，2ml/孔细胞（5×105cells/ml）种入6孔板，室温孵育1h使其贴壁，孵育后镜检其贴壁程度；
将4% agarose gel放入70℃水浴锅融解，空100ml无菌瓶与2×Grace放入40℃水浴锅预热；
将杆状病毒用无血清supplemented Grace梯度稀释：10-1~10-8。
弃6孔板内上清，快速加入稀释好的病毒，1ml/孔，复孔，室温孵育1h。
配置上层琼脂：加20ml高温灭活FBS到2×Grace 100ml，25ml 2×Grace（含FBS） 12.5ml 无菌水 12.5ml 4% agarose gel，至预热的100ml无菌瓶，轻轻混匀，放入37℃水浴锅备用；
弃6孔板内上清，快速加2ml上层琼脂，以防菌层干燥，静置10-20min使其凝固；
将6孔板放入27℃培养箱，培养4－10天；
计数板中噬菌斑，直至连续两天无变化，加1mg/ml中性红0.5ml，室温孵育2h后计数噬菌斑。
病毒滴度（pfu/ml）=1/稀释倍数×噬菌斑数×1/每孔接种体积
